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第二代CUBIC组织透明化试剂——CUBIC-L, R+(M) Trial Kit


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近年来,作为旨在理解复杂的神经网络的方法,应用组织透明化技术对大脑进行三维观察的技术备受关注。

CUBIC(Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational Analysis)是一种组织透明化技术,由东京大学研究生院 医学系研究科 上田泰己老师、顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师共同开发。

 

CUBIC-L, R+(M)Trial Kit由对应第二代CUBIC的4种溶液组成,不仅能够实现小鼠组织(包含大脑)和全身的透明化,还能够使狨猴组织(包含大脑)和全身、甚至是人组织块透明化。通过使用该试剂盒进行样品的透明化,能够精确地收集细胞类型、细胞功能、细胞间连接等信息,可更好地进行解析。与第一代 CUBIC 相比,第二代 CUBIC 提高了透明度。

 

 

◆试剂盒组成


试剂名称

规格

试剂用途

CUBIC-L Solution

125 mL×2

脱脂、脱色

CUBIC-L R+(M)Solution

125 mL×1

调整折射率

Mounting Solution 1

40 mL×1

观察样品用

Mounting Solution 2

40 mL×1

观察样品用



◆操作概要


以下是小鼠全脑及组织的透明化步骤。根据样品的大小和种类不同,最合适的实验方案会有所差异。


工序

试剂

温度

时间

摘除内脏、灌注固定

抽血

D-PBS

4°C

<5min

灌流

4% PFA

4°C

<5min

固定

4% PFA in PBS

4°C

12-24 h

脱脂、脱色

清洗

0.01% NaN3 in PBS

RT

>2 h×2 

前期置换

50% CUBIC-L Solution

37℃

>6 h

脱脂、脱色

50% CUBIC-L Solution

37℃

2-5 days

清洗

清洗

PBS

RT

>2 h×3 

折射率调整

前期置换

50% CUBIC-R+(M)Solution

RT

>6 h

折射率调整

50% CUBIC-R+(M)Solution

RT

过夜

CUBIC-R+(M) Solution

RT

24 h

观察

观察

Mounting Solution





◆数据


小鼠大脑的透明化实例


(1)荧光蛋白表达与细胞核染色的组合


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使用本产品对CAG-EGFP Tg小鼠全脑进行透明化处理,并使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色(RedDot2)。在光片显微镜下对染色后的样品进行观察。

(本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供)



(2)细胞核染色与免疫染色的组合


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使用本产品对B6N小鼠全脑进行透明化处理后,再使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色(SYTOX-G)和免疫染色(NeuN-A594)。染色后在光片显微镜下对样品进行观察。

(本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供)

细胞核染色以及免疫组织染色需要使用单独的试剂,详情请与yobo体育app官方下载苹果联系。



◆产品列表


产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

298-85101

CUBIC-L, R+(M) Trial Kit

CUBIC-L, R+(M)试剂盒小包装

组织透明化用

1 Kit



◆相关产品


CUBIC Trial Kit


FUJIFILM Wako提供第一代CUBIC试剂「CUBIC Trial Kit」,相比第二代CUBIC试剂拥有以下优点:①透明化过程肉眼可见 ②样品处理过程简单,适合透明化的初学者使用。


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(本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供)


产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

290-80801

CUBIC Trial Kit 

CUBIC试剂盒小包装

组织透明化用

1 Kit


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。



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